FROTIS SANGUÍNEO: Anaplasmosis Equino

FROTIS SANGUÍNEO: Anaplasmosis Equino: La ehrlichiosis y anaplasmosis son un grupo de enfermedades producidas por una bacteria gram negativa intracelular obligada. Es clasifi...

FROTIS SANGUÍNEO.

El estudio del frotis permite obtener información sobre el recuento diferencial de los leucocitos, cambios tóxicos y presencia de células neoplásicas. Así como también, cambios cualitativos de los eritrocitos y las plaquetas. Estos cambios pueden estar asociados a diversas patologías.

FUNDAMENTO,  TÉCNICA Y TINCIÓN.

Romanowski en 1819, fue el primer investigador  que combino azul de metileno y eosina para teñir sangre. Existen diferentes tipos de tinciones Romanowski  ampliamente  utilizadas, tales como: (a)  Leishman y  Wright, (b) MayGrünwald y Jenner, (c) Giemsa, (d) Pappenheim (Hemacolor), entre otros. En medicina veterinaria se utiliza con frecuencia las siguientes tipos de colorantes: Wright, Giemsa, Pappenheim (Hemacolor), entre otros.

 

ELABORACIÓN DEL FROTIS SANGUÍNEO

Método: Portaobjeto.

Fundamento:

Una buena extensión deberá tener como aspectos: ser grueso en uno de los extremos y desvanecida en el otro, de aspecto regular y uniforme. No debe presentar: lagunas, digitaciones y ondulaciones.

Procedimiento:

·         Tomar dos láminas porta-objeto limpias.

·          Mezclar la sangre completa varias veces por inversión suave.

·         Colocar con un aplicador una pequeña gota de sangre en uno de los extremos de la lámina.

·    Colocar  la lámina extensora  delante de la gota de sangre, retroceder la lámina  extensora hasta que toque la gota y esta se extienda por capilaridad a lo largo del borde de la misma.

·        Mantener una inclinación de 30 grados entre ambas láminas. Una vez que el borde de la lámina de porta-objeto extensor se impregna completamente de sangre, esta se desliza hacia delante, sin hacer presión excesiva, se recomienda  realizar un movimiento rápido, uniforme y continúo de modo que la sangre forme una delgada película.

·         El frotis se seca realizando movimientos al aire. No dejar en reposo. Finalmente, se procede a realizar la coloración (Wright, Giemsa, Pappenheim (Hemacolor), entre otros.

DEFECTOS DE COLORACIONES.

1.    Irregularidad en la intensidad de la tinción en varias zonas del frotis.

a.  Mezcla insuficiente del colorante en la solución amortiguadora.

b.  Variaciones del pH en la superficie del porta objeto (limpieza defectuosa).

c.   Durante el secado ha quedado agua en parte del frotis. Dejar secar el porta objeto sobre uno de sus lados, para acelerar el secado después del lavado.

2.    Aspecto de la coloración en todo el frotis.

a.    Se ha permitido que el agua actúe demasiado tiempo durante el lavado del porta objeto o este no se escurrió con suficiente rapidez.

b.    Insuficiente tiempo de coloración.

3.    Los núcleos se tiñen débilmente, pero los eritrocitos y los gránulos de los eosinófilos adquieren intensa coloración con la eosina.

a.   El agua empleada para diluir el colorante o el amortiguador era ácida.

b.   Se lavo el frotis con agua ácida.

c.   La superficie del portaobjeto ácida.

4.    Los núcleos muy azules, eritrocitos verdosos o azules y citoplasma de los leucocitos sin teñir.

a.  El agua empleada para diluir el colorante o el amortiguador era alcalina.

b.  Se lavó el frotis con agua alcalina.

c.   La superficie de portaobjeto estaba alcalina.

5.    Frotis cubierto por precipitado.

a.  No se quito bien el colorante del portaobjeto.

b.  Poca cantidad de colorante en el momento de la fijación, de modo que el alcohol que contiene el colorante se evaporó y precipitado el colorante.

c.   El tiempo de coloración se deja por mucho tiempo.

6.    Tinción excesiva:

a.  La tinción excesiva se corrige, sumergiendo el frotis en etanol a 95º y volviendo a teñir, disminuyendo el tiempo.

Anaplasmosis Equino

La ehrlichiosis y anaplasmosis son un grupo de enfermedades producidas por una bacteria gram negativa intracelular obligada. Es clasificada de acuerdo con la especificidad del hospedador y el tipo de célula sanguínea afectada. 

Muestras Sanguíneas en Medicina Veterinaria

 
MUESTRAS SANGUÍNEAS.  

Dra. Zulma Alvarez.

Médico Veterinario. Patología Clínica. E-learning.

Profesor Titular UCLA- DCV.Magister en Ciencias Biológicas.

Doctor en Tecnología Instruccional y Educación a Distancia.

El éxito del diagnostico clínico depende en gran parte de cuando y como se tomen las muestras, del cuidado para conservarlas, del tiempo transcurrido desde la recolección y el envió al laboratorio. Así como, de la correcta interpretación de los resultados en base al conocimiento de los procesos patológicos que se suceden en el organismo animal (Fonseca, 1990).  Es importante destacar que el valor del laboratorio de diagnostico dependerá de la forma que las muestras son obtenidas, conservadas y enviadas al laboratorio.

Obtención de Muestras Sanguíneas.

La práctica clínica del médico veterinario incluye la obtención de muestras de sangre y su adecuado manejo y envío al laboratorio. Hay ciertas condiciones que deben cuidarse, al decidir tomar una muestra para enviarla al laboratorio, tales como: especie, tipo de pruebas a realizar, volúmenes a colectar, tiempo transcurrido entre la toma y el análisis, etc. 

Es muy importante hacer siempre una adecuada identificación de las muestras que se envíen al  laboratorio de diagnóstico. Para ello debe utilizarse material que resista el manejo, como: tintas permanentes que no desaparezcan con el agua, etiquetas que se adhieran apropiadamente y no se desprendan durante el transporte.

 Es necesario acompañar las muestras con un protocolo, que presente; (a) datos de identificación del propietario y del médico veterinario tratante, que incluya la dirección y número de teléfono, (b) datos del animal, (c) indicar si se sospecha de enfermedades contagiosa, (d) signos clínicos observados, (e) tipo de alimentación, (f) tratamiento realizado y (g) diagnostico clínico presuntivo.

Los métodos que pueden utilizarse para extraer una muestra de sangre a partir de un vaso son: (1) Jeringa, (2) Sistema de tubos con vacío (Vacutainer®), (3) Aguja directa, entre otros.

LUGAR DE LA PUNCION

1.  Perro: Vena cefálica, femoral y yugular.

2.  Gato: Vena cefálica y yugular.

3.  Grandes animales: Vena yugular.  

4. Ganado vacuno: Vena yugular y coccígea.

ANTICOAGULANTE

EDTA es un anticoagulante que se presenta en forma de sal disódica o dipotásica, siendo esta última preferible por ser más soluble.  Se puede utilizar en forma líquida o en polvo.

1.    Cantidad: 1 gota de de solución de EDTA al 10% para 5 mL de sangre.

2.    Cantidad:1 mg EDTA en polvo /mL de sangre.

 

El tipo de anticoagulante a utilizar para realizar el estudio de la  morfología sanguínea es el EDTA. Este anticoagulante, preserva mejor la morfología de las células sanguíneas y no interfiere con las tinciones hematológicas.