viernes, 10 de junio de 2016

Antígenos de A. marginale y su relación con la anemia


Antígenos de A. marginale y su relación con la anemia presente en la anaplasmosis bovina.  Universidad Simón Bolívar. 2001. Dra. Zulma Alvarez. Tutor: Dr Aso Pedro.

Resumen

La anaplasmosis bovina es una enfermedad hemotrópica, causada por A. marginale. Se caracteriza por presentar una anemia cuya severidad no es proporcional con la parasitemia, se desconoce el mecanismo preciso. El presente trabajo se diseño con el fin de evaluar el rol de los antígenos de A. marginale en relación con la anemia presente en la anaplasmosis e identificar complejos inmunes sobre la membrana de eritrocitos. Para ello, se utilizaron bovinos holstein esplenectomizados, se inocularon con criopreservado de eritrocito bovinos infectados con A. marginale de tres aislados geográficos: Zulia, Táchira y Apure. Los becerros fueron sangrados y se obtuvieron: sueros, plasma, eluados de eritrocitos y se prepararon antígenos: soluble, particulado y para inmunofluorescencia indirecta (IFI)y directa IFD. Se evaluó la temperatura, los parámetros parasitólogicos y los índices hematimétricos. Los anticuerpos eluidos se le determinó el isotipo por medio de IFI y se evaluó el isotipo capaz de reconocer al antígeno soluble y extractos de eritrocitico normal mediante ELISA indirecto.  Se realizó una inmunotinción para conocer que antígenos de A. marginale son reconocidos por los anticuerpos eluidos de los eritrocitos. Los complejos inmunes se identificaron mediante IFD. Adicionalmente, se estudio una actividad hemolítica in vitro entre sueros y eritrocitos bovinos con anaplasmosis. Durante la anaplasmosis bovina, se evidenció una anemia macrocítica normocrómica y el estudio morfológico reveló una anisocitosis poiquilocitosis (esferocitos), esto es compatible con una anemia hemolítica autoinmune. Los anticuerpos opsonizantes eran del isotipo IgM / IgG y los dos isotipos reconocieron a los cuerpos del parásito mientras que los anticuerpos IgG reconocieron al antígeno soluble pero no fueron capaces de reconocer al material eritrocitico normal. Así mismo, se demostró por medio de la inmunotinción que anticuerpos IgG eluidos de los eritrocitos bovinos con anaplasmosis reconocen al antígeno corpuscular (A.. marginale) de peso molecular de 84, 80, 79, 62 y 47 kDa. Se logró demostrar la presencia anticuerpos del isotipo IgG sobre el cuerpo del parásito dentro del eritrocito por IFD utilizando anti-IgG bovina conjugada a FITC. En la anaplasmosis bovina se detectó hemólisis in vitro y parecen estar involucrados dos mecanismos, uno dependiente y otro independiente de la temperatura a 56 ºC. Estos resultados son consistentes con la idea de que los antígenos de A. marginale, constituyen un factor que conlleva a la formación de anticuerpos que pueden actuar contra los eritrocitos y con ello contribuir con la severidad de la anemia presente en esta enfermedad.



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