Anaplasmosis.

La anaplasmosis enfermedad infecciosa.

Anaplasmosis 

Los animales que sobreviven a la anaplasmosis aguda desarrollan un estado de portador crónico, que puede tener una duración de semanas a pocos meses y es caracterizado por una infección persistente con bajas parasitemia (menos de 1% de eritrocitos infectados).  En estos casos los animales infectados sirven como reservorio y no sufren los síntomas clínicos de la enfermedad.

Taxonomía y Filogenia

Anaplasma marginale se clasifica dentro del Orden Rickettsiales, Familia Anaplasmataceae, Género Anaplasma. Los organismos pertenecientes a este orden fueron reclasificados en base a los genes del 16S del RNAr. Dentro de la familia Anaplasmataceae se incluyeron los géneros: Anaplasma, Ehrlichia, Wolbachia, Neorickettsia.

En el género Anaplasma, se incluyen tres especies que afectan los rumiantes: A. marginale, A. marginale ss. centrale (referida como A. centrale) y A. ovis. Con esta reclasificación también quedaron incluidas en este género las especies A. phagocytophilum (incluye a Ehrlichia equi, E. phagocytophila y el agente causal de la ehrlichiosis granulocítica humana), Anaplasma bovis (E. bovis) y Anaplasma platys (E. platys).

                                                     Diagnostico

En la anaplasmosis bovina el diagnóstico clínico lo realiza el médico veterinario de acuerdo a la sintomatología que presenta el animal y los resultados de laboratorio. Los síntomas con que cursa esta enfermedad son: fiebre, anemia, debilidad, disminución láctea, abortos y algunas muertes rápidas, si no se instaura el tratamiento.


               Identificación del agente en un  frotis de sangre teñido con Giemsa-

Entre otras técnicas utilizadas para detectar el organismo se incluye la visualización al microscopio de los frotis de sangre teñidos con  Giemsa.  Esta  es  la  técnica  diagnóstica  de referencia y el método más común para la identificación de  A. marginale en animales con infección clínica.

El diagnóstico también se realiza por medio de pruebas serológicas, tales como: fijación de complemento, aglutinación capilar en tubo, aglutinación capilar en tarjeta, inmunofluorescencia indirecta (IFI), ensayo de inmunoenzimático (ELISA). Asi mismo, han sido descritas pruebas basadas en el ácido nucleico del parásito, estas permiten detectar las infecciones crónica en bovinos por A. marginale.

Control de la Anaplasmosis.

Los    mecanismos de    control    de  la  anaplasmosis en bovinos no  han    cambiado sustancialmente en los últimos 60 años. Las medidas de control varían de acuerdo a la  ubicación  geográfica  e  incluyen: (a) el  control  de  artrópodos  por  aplicación  de acaricidas,  (b) la  administración  profiláctica  de  los  antibióticos y (c) la  vacunación.  Sin embargo, el uso intensivo de antibióticos lleva el riesgo de  emergencia asociado al surgimiento de cepas resistentes de microorganismos.

 

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FROTIS SANGUÍNEO.

El estudio del frotis permite obtener información sobre el recuento diferencial de los leucocitos, cambios tóxicos y presencia de células neoplásicas. Así como también, cambios cualitativos de los eritrocitos y las plaquetas. Estos cambios pueden estar asociados a diversas patologías.

FUNDAMENTO,  TÉCNICA Y TINCIÓN.

Romanowski en 1819, fue el primer investigador  que combino azul de metileno y eosina para teñir sangre. Existen diferentes tipos de tinciones Romanowski  ampliamente  utilizadas, tales como: (a)  Leishman y  Wright, (b) MayGrünwald y Jenner, (c) Giemsa, (d) Pappenheim (Hemacolor), entre otros. En medicina veterinaria se utiliza con frecuencia las siguientes tipos de colorantes: Wright, Giemsa, Pappenheim (Hemacolor), entre otros.

 

ELABORACIÓN DEL FROTIS SANGUÍNEO

Método: Portaobjeto.

Fundamento:

Una buena extensión deberá tener como aspectos: ser grueso en uno de los extremos y desvanecida en el otro, de aspecto regular y uniforme. No debe presentar: lagunas, digitaciones y ondulaciones.

Procedimiento:

·         Tomar dos láminas porta-objeto limpias.

·          Mezclar la sangre completa varias veces por inversión suave.

·         Colocar con un aplicador una pequeña gota de sangre en uno de los extremos de la lámina.

·    Colocar  la lámina extensora  delante de la gota de sangre, retroceder la lámina  extensora hasta que toque la gota y esta se extienda por capilaridad a lo largo del borde de la misma.

·        Mantener una inclinación de 30 grados entre ambas láminas. Una vez que el borde de la lámina de porta-objeto extensor se impregna completamente de sangre, esta se desliza hacia delante, sin hacer presión excesiva, se recomienda  realizar un movimiento rápido, uniforme y continúo de modo que la sangre forme una delgada película.

·         El frotis se seca realizando movimientos al aire. No dejar en reposo. Finalmente, se procede a realizar la coloración (Wright, Giemsa, Pappenheim (Hemacolor), entre otros.

DEFECTOS DE COLORACIONES.

1.    Irregularidad en la intensidad de la tinción en varias zonas del frotis.

a.  Mezcla insuficiente del colorante en la solución amortiguadora.

b.  Variaciones del pH en la superficie del porta objeto (limpieza defectuosa).

c.   Durante el secado ha quedado agua en parte del frotis. Dejar secar el porta objeto sobre uno de sus lados, para acelerar el secado después del lavado.

2.    Aspecto de la coloración en todo el frotis.

a.    Se ha permitido que el agua actúe demasiado tiempo durante el lavado del porta objeto o este no se escurrió con suficiente rapidez.

b.    Insuficiente tiempo de coloración.

3.    Los núcleos se tiñen débilmente, pero los eritrocitos y los gránulos de los eosinófilos adquieren intensa coloración con la eosina.

a.   El agua empleada para diluir el colorante o el amortiguador era ácida.

b.   Se lavo el frotis con agua ácida.

c.   La superficie del portaobjeto ácida.

4.    Los núcleos muy azules, eritrocitos verdosos o azules y citoplasma de los leucocitos sin teñir.

a.  El agua empleada para diluir el colorante o el amortiguador era alcalina.

b.  Se lavó el frotis con agua alcalina.

c.   La superficie de portaobjeto estaba alcalina.

5.    Frotis cubierto por precipitado.

a.  No se quito bien el colorante del portaobjeto.

b.  Poca cantidad de colorante en el momento de la fijación, de modo que el alcohol que contiene el colorante se evaporó y precipitado el colorante.

c.   El tiempo de coloración se deja por mucho tiempo.

6.    Tinción excesiva:

a.  La tinción excesiva se corrige, sumergiendo el frotis en etanol a 95º y volviendo a teñir, disminuyendo el tiempo.